现代生物学仪器实验技术

齐凤慧,王江,曹子茜,刘淼,赵娜

目录

  • 1 高效液相色谱仪
    • 1.1 高效液相色谱的发展
    • 1.2 高效液相色谱仪结构
      • 1.2.1 色谱泵
      • 1.2.2 进样器
      • 1.2.3 检测器
      • 1.2.4 色谱柱
    • 1.3 高效液相色谱原理
    • 1.4 色谱图
    • 1.5 液相色谱流动相
    • 1.6 液相色谱定量分析
    • 1.7 液相色谱的基本操作
    • 1.8 高效液相色谱课件
  • 2 四极杆飞行质谱
    • 2.1 课程内容
  • 3 原子吸收光谱仪
    • 3.1 原子吸收光谱仪结构
      • 3.1.1 光源
      • 3.1.2 火焰原子化器
      • 3.1.3 石墨炉原子化器
      • 3.1.4 分光系统、检测与显示系统
    • 3.2 原子吸收光谱仪基本原理
    • 3.3 原子吸收光谱仪常用术语及定量分析方法
    • 3.4 原子吸收光谱仪基本操作步骤
  • 4 流式细胞仪
    • 4.1 流式细胞术的原理
    • 4.2 流式的数据分析
    • 4.3 如何设计流式实验
    • 4.4 流式细胞仪的基本操作及技巧
    • 4.5 流式细胞仪常见应用
    • 4.6 流式细胞仪的基本操作步骤
  • 5 酶标仪
    • 5.1 酶标仪基本介绍
    • 5.2 酶标仪技术原理及应用
    • 5.3 酶标仪的基本操作步骤
  • 6 实时荧光定量PCR仪
    • 6.1 实时荧光定量PCR概述
    • 6.2 实时荧光定量PCR基本原理
    • 6.3 实时荧光定量PCR实验方法
    • 6.4 实时荧光定量PCR应用
  • 7 高分辨率活细胞成像系统
    • 7.1 高分辨率活细胞成像系统的原理
    • 7.2 高分辨率活细胞成像系统的组成及优势
      • 7.2.1 DeltaVision系统的关键组成
      • 7.2.2 DeltaVision活细胞成像系统优势
    • 7.3 高分辨率活细胞成像系统的主要应用
  • 8 小动物活体光学成像
    • 8.1 小动物活体光学成像原理概述
    • 8.2 活体光学成像技术相关应用
    • 8.3 活体光学成像技术 图像分析
原子吸收光谱仪基本原理

    原子吸收光谱仪基本原理


研究进展

(1) 自动化程度方面发展加快,20世纪70年代,普遍采用计算机技术。原子吸收扣背景技术方面,出现可变磁场塞曼扣背景的仪器,如德国Jena公司的AAS  Zeenit60原子吸收分光光度计。

(2)连续光源原子吸收分光光度计(CS-AAS)是对原子吸收分光光度计的重大突破,如德国Jena的ContrAA,具有同时多元素定量/定性分析的能力。

(3)目前,美国Varian公司的AA280、AA240SF,PE公司的AA800,900等的原子吸收分光光度计是该领域的最高档仪器,性能技术指标,功能技术指标,都属世界之最。

我国有近20家企业生产不同型号和类型的原子吸收分光光度计,可靠性、软件、附件、工艺等仍有一定差距,如北京普析通用公司的TAS-986和TAS-990等原子吸收分光光度计。

原子吸收分光光度计的基本原理

在原子的吸收和发射过程中,所放出的能量和所接收到的能量与辐射或吸收的电磁波(光是特殊波长范围内的电磁波)的波长有着严格的对应关系, 即:
△E= hv

式中△E一两状态的能量差
h一普朗克常量
V一辐射的电磁波频率
定量依据:通过测量辐射光源的吸收程度,可以定量确定分析物的含量。

朗伯-比尔吸收定律

式中A一 吸光度

I0一入射光强度

I一透射光强度

T一透过率

K一吸光系数

C一样品中被测元素的浓度

L一光通过原子化器的光程

比尔定律:当一束平行的单色光通过某一均匀的有色溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度和光程的乘积成正比。这是定量分析的最基础、最根本的依据,也是原子吸收分光光度计的基本原理。

仪器框图


原子吸收光谱分析是根据被测元素基态原子对共振辐射的吸收程度,来确定试样中被测元素浓度的分析方法。

比尔定律
      A = ax bx c

A = 吸收度

  a= 吸收常数

  b= 光径长度

  c= 样品浓度

v对已知样品与特定仪器而言a和b是常数v因此 : A= k ×c

原子吸收中的信号是什么?

  AAS是一种原子对光辐射产生吸收的光谱分析方法;研究的是原子对某特定频率,强度固定的 辐射产生吸收后其强度的变化,通过其变化与试样浓度之间的关系来确定组分的浓度

如果光源强度为I0,则吸收后信号为I,光强度的变化为      Ia= I0-I

实际测量的是透过率T=(I0-I)/I0,其关系式仍然还是朗伯-比尔定律

所不同的是结果受波长的影响很大.因为原子吸收线是线状光谱

几种常见信号强度的含义: