现代生物学仪器实验技术

齐凤慧,王江,曹子茜,刘淼,赵娜

目录

  • 1 高效液相色谱仪
    • 1.1 高效液相色谱的发展
    • 1.2 高效液相色谱仪结构
      • 1.2.1 色谱泵
      • 1.2.2 进样器
      • 1.2.3 检测器
      • 1.2.4 色谱柱
    • 1.3 高效液相色谱原理
    • 1.4 色谱图
    • 1.5 液相色谱流动相
    • 1.6 液相色谱定量分析
    • 1.7 液相色谱的基本操作
    • 1.8 高效液相色谱课件
  • 2 四极杆飞行质谱
    • 2.1 课程内容
  • 3 原子吸收光谱仪
    • 3.1 原子吸收光谱仪结构
      • 3.1.1 光源
      • 3.1.2 火焰原子化器
      • 3.1.3 石墨炉原子化器
      • 3.1.4 分光系统、检测与显示系统
    • 3.2 原子吸收光谱仪基本原理
    • 3.3 原子吸收光谱仪常用术语及定量分析方法
    • 3.4 原子吸收光谱仪基本操作步骤
  • 4 流式细胞仪
    • 4.1 流式细胞术的原理
    • 4.2 流式的数据分析
    • 4.3 如何设计流式实验
    • 4.4 流式细胞仪的基本操作及技巧
    • 4.5 流式细胞仪常见应用
    • 4.6 流式细胞仪的基本操作步骤
  • 5 酶标仪
    • 5.1 酶标仪基本介绍
    • 5.2 酶标仪技术原理及应用
    • 5.3 酶标仪的基本操作步骤
  • 6 实时荧光定量PCR仪
    • 6.1 实时荧光定量PCR概述
    • 6.2 实时荧光定量PCR基本原理
    • 6.3 实时荧光定量PCR实验方法
    • 6.4 实时荧光定量PCR应用
  • 7 高分辨率活细胞成像系统
    • 7.1 高分辨率活细胞成像系统的原理
    • 7.2 高分辨率活细胞成像系统的组成及优势
      • 7.2.1 DeltaVision系统的关键组成
      • 7.2.2 DeltaVision活细胞成像系统优势
    • 7.3 高分辨率活细胞成像系统的主要应用
  • 8 小动物活体光学成像
    • 8.1 小动物活体光学成像原理概述
    • 8.2 活体光学成像技术相关应用
    • 8.3 活体光学成像技术 图像分析
原子吸收光谱仪常用术语及定量分析方法

      原子吸收光谱仪常用术语及定量分析方法

1.常用术语

特征浓度:表征火焰原子吸收分光光度计灵敏度的性能技术指标。为被分析元素产生 0.0044 (1 % )吸光度所需浓度。不同的仪器,特征浓度不一 样。 可按下列公式计算:

 Char.Conc. = (标样浓度 * 0.0044) / 平均吸光度

(通常在校正曲线线性范围内测,如<0.2ABS)

特征质量:表征石墨炉分析灵敏度的性能技术指标。10-12g左右在石墨炉分析中,被分析元素产生0.0044吸光度所需质量(以皮克为单位 )。可按下公式计算:

Char. Mass = (标样浓度 * 0.0044* 进样体积) / 标样吸光度


灵敏度(Sensitivity)IUPAC (国际纯粹与应用化学联合会)推荐为:分析信号随分析物浓度变化的速度,即校正曲线的斜率。灵敏度用S表示  S=dA/dc

检出限(DetectionLimit)lIUPAC规定以空白试验的三倍标准偏差所对应的含量为检出限l指能产生一个能够确证在试样中存在某元素的分析信号所需要的该元素的最小含量。这是仪器所能检出的高于背景噪声的最低限。又称为DLlDL=3σ/S(σ为用空白溶液测量11次信号的标准偏差)l在检出限附近,因测量精度一般较差。要进行较准确的测量是 不可能的。所以,正常测量因至少在高于检出限5-10倍的浓度范围进行,此范围内测量精度可达3-5%。

精密度 是对同一试样进行多次测量所得结果的重复程度。精密度分仪器精密度和方法精密度,后者由测定过程中的随机误差决定。指分析测试结果数据的离散性或重复性。精密度RSD用下式表示:RSD=σ/A

(σ对某试液多次测定的标准偏差,A为多次测定的平均值)

准确度 表示测定值与真值的符合程度 常用标准物质作比较来计算 如果没有标准物质,则需要用加标回收率来证实。

2.定量分析方法

(1)标准曲线法Standard Curve Method


与其他分光光度法相似,用标准溶液配制标准系列,分别测定其吸光度。以测得的吸光度为纵坐标,元素浓度为横坐标,建立校正曲线A=f(c)。在相同的实验条件下,测定样品试样溶液的吸光度,根据测得的吸光度从标准曲线上求出样品中待测元素的含量。特点:简单、快速,仅适用于组成简单、干扰较少的样品。在实际分析中,有时出现标准曲线弯曲的现象,尤其在浓度高的时候曲线向浓度坐标弯曲。

(2)标准加入法Standard Addition  Method

1)当试样基体影响较大,又无纯基体空白;2)测定纯物质中极微量元素时。

方法:若干份同样体积的试样中,分别按比例加入不同量待测元素的标准溶液,并稀释至相同体积,再分别测定其吸光度A。以加入的标准浓度为横坐标,A为纵坐标,作图的直线。

a.计算截距,以加入待测元素的标准浓度为横坐标,相应的吸光度为纵坐标作图可得一直线,此直线的延长线与横坐标轴的交点到原点的距离相应的浓度为原始试样中待测元素的浓度。

 b.通过原点,适用于测定多个基体组成相似的样品。以加入待测元素的标准浓度为横坐标,纵坐标为其相应吸光度分别减去样品的吸光度。