现代生物学仪器实验技术

齐凤慧,王江,曹子茜,刘淼,赵娜

目录

  • 1 高效液相色谱仪
    • 1.1 高效液相色谱的发展
    • 1.2 高效液相色谱仪结构
      • 1.2.1 色谱泵
      • 1.2.2 进样器
      • 1.2.3 检测器
      • 1.2.4 色谱柱
    • 1.3 高效液相色谱原理
    • 1.4 色谱图
    • 1.5 液相色谱流动相
    • 1.6 液相色谱定量分析
    • 1.7 液相色谱的基本操作
    • 1.8 高效液相色谱课件
  • 2 四极杆飞行质谱
    • 2.1 课程内容
  • 3 原子吸收光谱仪
    • 3.1 原子吸收光谱仪结构
      • 3.1.1 光源
      • 3.1.2 火焰原子化器
      • 3.1.3 石墨炉原子化器
      • 3.1.4 分光系统、检测与显示系统
    • 3.2 原子吸收光谱仪基本原理
    • 3.3 原子吸收光谱仪常用术语及定量分析方法
    • 3.4 原子吸收光谱仪基本操作步骤
  • 4 流式细胞仪
    • 4.1 流式细胞术的原理
    • 4.2 流式的数据分析
    • 4.3 如何设计流式实验
    • 4.4 流式细胞仪的基本操作及技巧
    • 4.5 流式细胞仪常见应用
    • 4.6 流式细胞仪的基本操作步骤
  • 5 酶标仪
    • 5.1 酶标仪基本介绍
    • 5.2 酶标仪技术原理及应用
    • 5.3 酶标仪的基本操作步骤
  • 6 实时荧光定量PCR仪
    • 6.1 实时荧光定量PCR概述
    • 6.2 实时荧光定量PCR基本原理
    • 6.3 实时荧光定量PCR实验方法
    • 6.4 实时荧光定量PCR应用
  • 7 高分辨率活细胞成像系统
    • 7.1 高分辨率活细胞成像系统的原理
    • 7.2 高分辨率活细胞成像系统的组成及优势
      • 7.2.1 DeltaVision系统的关键组成
      • 7.2.2 DeltaVision活细胞成像系统优势
    • 7.3 高分辨率活细胞成像系统的主要应用
  • 8 小动物活体光学成像
    • 8.1 小动物活体光学成像原理概述
    • 8.2 活体光学成像技术相关应用
    • 8.3 活体光学成像技术 图像分析
原子吸收光谱仪基本操作步骤

    原子吸收光谱仪基本操作步骤


火焰操作基本步骤

准备工作

1、 火焰分析需要打开如下两项附件:

1.1空气压缩机(请保证干燥过滤器上的压力为0.4 Mp)

1.2乙炔(压力调至0.1Mp)(乙炔钢瓶压力低于0.6Mp请更换)

2、 如果仪器处于石墨炉模式,请按照下面的步骤转换到石墨炉分析步骤:

File- - Change Technique—Flame火焰

基本操作步骤。

火焰的基本操作步骤主要分为如下五个步骤:

点灯—编辑方法—规定样品 --(硬件调节)—分析—查看结果--数据处理

其中硬件调节一部分属于可选项,如果仪器已经处于调整好的状态,可以忽略此环节。

1 点灯。通过快捷按钮上的打开电灯窗口,如下图:


通过 点击 元素符号左侧的 On/Off 打开或者关闭灯电源。

通过点击 Setup 栏中对应的灯位置按钮(例如 Lamp 1),让仪器反射元素灯的光线,直到有能量值显示出来。

2 建立方法。

通过 File--New—Method ,出现如下图的新建方法页面。


在上图中 Element 右侧,选择准备分析的元素符号,例如 Cu 。之后点击 OK , 出现下面的页面。


在 Spectrometer 的 Define Element 中,基本不用改动参数。

请根据国标等来决定 Signal type 是使用 AA 或者 AA-BG。

Sampler 章节中,基本不需要改动。

在Calibration中Equation and Unit选定合适的方程;

在Standard Concentration中输入标准样品的浓度;

之后,通过 File--save-method 保存方法

3 设定样品名称.

通过点击快捷按钮上的,打开如下的页面:


在样品信息编辑器中,输入相应的Sample ID样品名称。

之后关闭样品信息编辑器。

4 点火。

通过快捷菜单上的按钮,打开下面的页面.

上图中出现红色的叉号,可能的原因是:

A 没有空气压力 No air pressure (请检查空气压力)

B 没有乙炔压力 No Fuel Pressure (请检查乙炔压力)

C 没有燃烧头 No Burner Head (请检查燃烧头是否安装)

D 没有雾化器 Nebulizer missing (请检查无化器安装情况)

E 液封装置缺水 Drain not Connected (请用洗瓶向废液通盖子上的小孔加水)

上述条件满足之后,红色的叉号会变成绿色的对勾.之后点击On/OFF按钮即可点火。

5 分析。

点击快捷按钮上的打开分析页面如下:


分析之前,通过 Result Data Set name右侧的Open,指定结果保存的位置。

之后就可以进行正常的分析了。

Analyze Blank ---分析空白

Analyze Standard  ---分析标准样品

Analyze Sample ---分析样品

6.查看结果。

 --结果窗口       --校准曲线窗口      --瞬时峰形窗口

7 数据处理。

具体数据处理有两种途径。

7.1 可以将之前分析的数据进行再处理。

7.2 File—Utilities—Data Manager。可以讲数据导出成Excel格式。

详细步骤请咨询维修工程师或者技术支持。

8 分析结束.

分析结束之后,在火焰熄灭的情况之下,将乙炔气瓶总阀门关闭。

之后打开点火页面,点击Bleed Gas,将管路中的乙炔气体排空。

之后关闭空气压缩机电源。关闭软件。关闭仪器电源。

石墨炉操作基本步骤


准备工作

1、 石墨炉分析需要打开如下两项附件:

1.1水循环制冷机(国产水循环压力调至3bar,进口水循环无需理会)

1.2氩气(压力调至0.4Mp)

2、 如果仪器处于火焰模式,请按照下面的步骤转换到石墨炉分析步骤:

File- - Change Technique--Furnace石墨炉

基本操作步骤。

石墨炉的基本操作步骤主要分为如下五个步骤:

点灯—编辑方法—规定样品 --(硬件调节)—分析—查看结果--数据处理

其中硬件调节一部分属于可选项,如果仪器已经处于调整好的状态,可以忽略此环节。

  1. 点灯。通过快捷按钮上的打开点灯窗口,如下图:


    通过 点击 元素符号左侧的 On/Off 打开或者关闭灯电源。

    通过点击 Setup 栏中对应的灯位置按钮(例如 Lamp 1),让仪器反射元素灯的光线,直到有能量值显示出来。


  2. 2 建立方法。

  3. 通过 File--New—Method ,出现如下图的新建方法页面。

    在上图中 Element 右侧,选择准备分析的元素符号,例如 Cu 。之后点击 OK , 出现下面的页面。

    在 Spectrometer 的 Define Element 中,基本不用改动参数。

    之后打开Spectrometer的Setting页面,如下图:


    将分析次数改为2次,其余不改动。

    之后打开Sampler页面,如下图:

    在Sampler--Furnace Program 页面中,基本上不需要改变参数。 如果需要改变,那么基本上改变第三步 (降低灰化温度,尤其是不添加改进剂时)。

    之后打开Sampler 的Autosampler页面,如下图:


  4. 在上图中Diluent Location设定稀释液的位置,并在相应的自动进样器位置放好稀释液。

  5. 之后打开Calibration页面。如下图:

    在Equation中选择相应的校准曲线。一般使用Nonlinear Thro Zero。

    之后点击Standard Concentration页面,如下图:


    打开上面的页面之后,不要急于输入。

    直接点击 Calculate Standard Volumes,进入下面的页面:

在上图中,从上至下,将 Standard 的浓度、Stock Standard 的位置和浓度以及Calibration Blank 的位置输入好,点击OK, 返回Standard Concentrations页面。这时候,参与校准的空白和标准点已经在Standard Concentrations中填好。

之后点击 File--Save—Method,输入方法名称,将方法保存。

3 设定样品。

点击快捷按钮上的

3 设定样品。

点击快捷按钮上的,打开下面的页面:


在 A/S Location 中输入样品的位置。 在 Sample ID 中输入样品的名称。之后将窗口关闭。(如果以后经常使用这个样品信息,也可以将其保存。)

4 石墨炉硬件调节。

硬件控制页面可以通过点击快捷按钮上的调出,如下图。

具体每个按钮的作用正如旁边的中文所示,不再详细介绍,只对调节进样针多介绍一些。

调整进样针的步骤如下:

点击 Align Tip 之后进入下面的页面。具体每一项的用途,请参考图中红色中文提示。

5 分析。

点击快捷按钮上的,打开自动分析窗口,如下:

上图为Auto Analysis Control页面的 Setup 页面。在此页面中,需要点击中部右侧的 Open, 指定结果数据组名称。(重要:否则以后数据将无法保存和处理)

之后,点击Analyze页面,如下图:


点击上图中的 Rebuild List(刷新列表).之后点击相应的分析按钮进行分析。

Analyze All(分析所有)= Calibrate(校准曲线) + Analyze Sample(分析样品)

Select Loc 指定分析某个位置的样品

Priority 优先。如果有紧急样品需要作为下一个样品分析,那个可以使用这个按 钮插入样品。

6.查看结果。 

--结果窗口      --校准曲线窗口      --瞬时峰形窗口

7 数据处理。

具体数据处理有两种途径。

7.1 可以将之前分析的数据进行再处理。

7.2 File—Utilities—Data Manager。可以讲数据导出成Excel格式。

详细步骤请咨询维修工程师或者技术支持。

8分析结束。

分析结束之后,请将水循环制冷机关闭,将氩气关闭。关闭软件。关闭仪器电源。