如何设计流式实验
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如何设计流式实验
样品制备
贴壁细胞:
将单层培养细胞中的旧培养液倒掉,需用胰酶消化细胞适当时间后,在倒置荧光显微镜下观察,见细胞稍变圆时,立即终止消化,收集细胞,用培养基或PBS反复吹打,收集待测样品细胞,离心后标记荧光素偶联抗体即可。上机前用300目尼龙筛过滤,除去组织团块。
悬浮细胞:
体外培养的悬浮细胞,则直接收集细胞于离心管中,离心沉淀细胞,然后用PBS重悬沉淀,取适量细胞于离心管中,标记荧光素偶联抗体,洗去未结合的抗体,用PBS重悬细胞于流式管中,可上样分析样品细胞。上机前用300目尼龙筛过滤,除去组织团块。