现代生物学仪器实验技术

齐凤慧,王江,曹子茜,刘淼,赵娜

目录

  • 1 高效液相色谱仪
    • 1.1 高效液相色谱的发展
    • 1.2 高效液相色谱仪结构
      • 1.2.1 色谱泵
      • 1.2.2 进样器
      • 1.2.3 检测器
      • 1.2.4 色谱柱
    • 1.3 高效液相色谱原理
    • 1.4 色谱图
    • 1.5 液相色谱流动相
    • 1.6 液相色谱定量分析
    • 1.7 液相色谱的基本操作
    • 1.8 高效液相色谱课件
  • 2 四极杆飞行质谱
    • 2.1 课程内容
  • 3 原子吸收光谱仪
    • 3.1 原子吸收光谱仪结构
      • 3.1.1 光源
      • 3.1.2 火焰原子化器
      • 3.1.3 石墨炉原子化器
      • 3.1.4 分光系统、检测与显示系统
    • 3.2 原子吸收光谱仪基本原理
    • 3.3 原子吸收光谱仪常用术语及定量分析方法
    • 3.4 原子吸收光谱仪基本操作步骤
  • 4 流式细胞仪
    • 4.1 流式细胞术的原理
    • 4.2 流式的数据分析
    • 4.3 如何设计流式实验
    • 4.4 流式细胞仪的基本操作及技巧
    • 4.5 流式细胞仪常见应用
    • 4.6 流式细胞仪的基本操作步骤
  • 5 酶标仪
    • 5.1 酶标仪基本介绍
    • 5.2 酶标仪技术原理及应用
    • 5.3 酶标仪的基本操作步骤
  • 6 实时荧光定量PCR仪
    • 6.1 实时荧光定量PCR概述
    • 6.2 实时荧光定量PCR基本原理
    • 6.3 实时荧光定量PCR实验方法
    • 6.4 实时荧光定量PCR应用
  • 7 高分辨率活细胞成像系统
    • 7.1 高分辨率活细胞成像系统的原理
    • 7.2 高分辨率活细胞成像系统的组成及优势
      • 7.2.1 DeltaVision系统的关键组成
      • 7.2.2 DeltaVision活细胞成像系统优势
    • 7.3 高分辨率活细胞成像系统的主要应用
  • 8 小动物活体光学成像
    • 8.1 小动物活体光学成像原理概述
    • 8.2 活体光学成像技术相关应用
    • 8.3 活体光学成像技术 图像分析
流式细胞仪的基本操作及技巧

    流式细胞仪的基本操作及技巧

光电倍增管电压设定

流式细胞仪利用光电倍增管(PMT)将各通道检测到的荧光信号转变为电子信号进行分析,并且在转变信号时按照一定的比例关系提高电子信号的强度。

流式分析时每一个使用到的流式通道都必须设定其合适的电压,才能保证流式分析时得到正确的结果。

各通道电压的设定一般是在上样分析第一管时设定的,通常是阴性对照或者同型对照管一旦设定了对照管的电压,后面各实验组上样时就不能再改变电压的值,否则会因为电压不一致导致各实验组之间没有可比性。

各通道电压的调节

FSC信号,其设定原则时使样品细胞或者目标细胞位于流式图的中央或者靠近中央的位置。

SSC信号主要是考虑样品细胞或者目标细胞的颗粒度大小,SSC电压使样品细胞或者目标细胞位于流式图的中央或者靠近中央的位置。

调节荧光通道设置电压的基本原则使将自发荧光控制在数轴的1/4范围内,即荧光信号在1/4内的细胞都是阴性细胞,荧光信号超过1/4的细胞为阳性细胞。