一、什么是细胞器？

     细胞器（organelle）一般认为是散布在细胞质内具有一定形态和

功能  的微结构或微器官。

  细胞中的细胞器主要有：线粒体、内质网、中心体、叶绿体，高尔基 

体、核糖体等。它们组成了细胞的基本结构，使细胞能正常的工作，运

转。

二、观察细胞器的工具有哪些？

显微镜分类：包括光学显微镜和电子显微镜

光学显微镜：

1、普通光学显微镜：分辨率达微米，用于观察组织的显微结构及细胞形态、数量、生长状态等。

2、相差显微镜：用于观察活细胞的细微结构。

3、荧光显微镜：对能发射荧光的物质进行定性和定量分析。

4、激光扫描共聚焦显微镜：

可对观察样品进行断层扫描和成像；

可无损伤地观察和分析细胞三维空间结构；

可进行活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记的观察。

电子显微镜：

1、透射电子显微镜：

把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上，电子与样品中的原子碰撞而改变方向，形成明暗不同的影像。对样品密度、厚度有要求，需要50-100nm超薄切片。

2、扫描电子显微镜：

用聚焦电子束在样品表面逐点扫描成像，

可研究物质微观结构（纳米级）。放大倍数可达10-1000000倍，常用于获取细胞或组织表面的立体成像。

三、光学显微镜的原理与应用

显微镜的主要部分是物镜和目镜，为两组焦距较短的凸透镜。

物镜的焦距（F1）短，目镜的焦距（F2）略长。物体AB位于物镜的2倍焦距和1倍焦距之间，所以在物镜的像方形成一个倒立的放大的实像A’B’；A’B’位于目镜的1倍焦距以内，经目镜放大为虚像A’’B’’，A’’B’’位于人眼的明视距离内。A’’B’’的视角比眼睛直接看AB时视角大得多，所以用显微镜可以看清微小的东西，但人眼通过目镜所看到的是被放大了2次的倒立的像。

四、在光学显微镜下能观察到哪些细胞器？

光学显微镜：线粒体、叶绿体、液泡。

电子显微镜：线粒体、叶绿体、高尔基体、内质网、中心体、溶酶体、液泡、核糖体、过氧化物酶体、微体、细菌质粒。

五、实验目的

•了解细胞的一般形态和基本结构

•初步掌握细胞生物学实验绘图方法

•观察动植物活细胞内线粒体及植物活细胞液泡系的形态、发育和分布

•了解细胞和细胞器的超活染色技术

六、实验原理

•活体染色：是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。它的目的是显示生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。

活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。 根据所用染色剂的性质和染色方法的不同，通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类，体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里，达到易于识别的目的。体外活染又称超活染色，它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块，以染料溶液浸染，染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。

活体染料如何固定、堆积在细胞内某些特殊的部分？

主要是染料的“电化学“特性起重要作用。

碱性染料的胶粒表面带阳离子，酸性染料的胶粒表面带有阴离子，而被染的部分本身也是具有阴离子或阳离子，这样，它们彼此之间就发生了吸引作用。但不是任何染料皆可以作为活体染色剂之用，应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，而且总是要配成稀淡的溶液来使用；一般是以碱性染料最为适用。可能因为它具有溶解在类脂质(如卵磷脂、胆固醇等)的特性，易于被细胞吸收。

实验步骤：

一、细胞形态结构的观察

1、洋葱鳞茎表皮细胞的标本制备与观察

（1）刀片取洋葱内表皮（3～5mm的正方形）

（2）用镊子夹住内皮，轻轻撕下，置于载玻片上展平

（3）加适量碘液，5～10min后，盖上盖玻片

（4）用吸水纸拭去过多的碘液

（5）置显微镜下观察

2、人口腔黏膜上皮细胞的标本制备与观察

（1）滴适量甲苯胺蓝（或碘液）于载玻片上

（2）用无菌牙签在口腔颊部轻轻刮取口腔黏膜细胞

（3）于甲苯胺蓝（或碘液）上适当涂抺，染色2min

（4）盖上盖玻片，用吸水纸拭去过多的染液

（5）置显微镜下观察

3、人血细胞涂片的制作与观察

二、细胞器的光学显微镜观察