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微藻培养的工艺流程主要有下面下几步:1.培养容器、工具和培养用水的消毒2、培养液的配置3、接种 4、培养过程的日常管理 5、采收 6、干燥。
首先我们来看一下微藻培养的第一步:培养容器、工具以及培养用水的消毒。培养容器、工具的消毒方法有两种,一种是物理消毒法,一种是化学消毒法。物理消毒法有加热消毒和紫外线消毒两种。加热消毒法是利用高温使蛋白质变性杀死微生物,从而达到消毒的目的。 第一种加热消毒法直接灼烧灭菌:像接种环就可以通过直接灼烧法来灭菌,将接种环放在酒精灯上灼烧。第二种加热消毒法是煮沸消毒:将培养容器和工具放到锅里用沸水煮15~30min来消毒。第三种热法消毒法是烘箱干燥消毒:将烘箱调到120~170℃,把培养容器和工具加热2h进行消毒。紫外线消毒法是针对空气和物体表面消毒。
化学消毒法可以通过酒精、高锰酸钾、石炭酸、盐酸、漂白粉、洗液等化学试剂对培养容器和工具进行消毒。
培养容器和工具消毒完成后我们就需要对培养用水来进行消毒。对培养用水的消毒方法有三种,第一种是加热消毒法:适用一级培养和二级培养。加热消毒法把经沉淀或沉淀后再经砂过滤的水,在三角烧瓶或铝锅中加热消毒。第二种是过滤除菌法:适用三级培养。把沉淀的水经砂滤或池砂滤罐过滤,把大型的生物或非生物杂质杂质除去,再经陶瓷过滤罐过滤。
第三种是漂白粉消毒法。漂白粉80-100mg/L处理消毒12-14h,加入硫代硫酸钠60-80mg/L,2即可使用。
对培养容器培养工具以及培养用水消毒完以后我们就需要进行培养液的配置。进行培养液的配置时首先要根据据培养藻类的生理需求来选择培养液。然后来进行培养液的制备。将培养用水进行消毒,根据选择的培养液的配方和配置的体积,对营养盐用量的计算,最后添加营养盐进行配置。
配置好培养液后我们就可以进行藻种的接种了。藻种接种成功的关键主要有三点,第一藻种的质量、第二藻种的数量、第三接种时间。
在接种时我们首先要选择质量好的藻种来进行接种,这是我们能否接种成功的关键。我们要选取无敌害生物污染、生活力强、生长旺盛,上浮明显, 藻液的外观藻液正常,无大量沉淀和无明显附壁现象的藻种。
在接种藻种时,要注意接种的数量。接种藻种的数量“宜大不宜小”。一级培养时的藻种量与培养液量之比为1:2~1:4。二、三级培养的接种比例一般为1:10~1:20为宜,不低于1:50。
在接种藻种时还要注意接种时间,接种时间也是决定藻种能否接种成功的因素。 一般接种藻种会选择选择在晴天上午8~10时进行。因为不少藻类晚上藻细胞下沉,而白天藻细胞有趋光上浮的习性,尤其是具有运动能力的种类更明显。上午8—10时一般是藻细胞上浮明显的时候,此时接种可以吸取上浮的且运动能力强的藻细胞做藻种,弃去底部沉淀的藻细胞,起着择优的作用。
藻种接种完成以后就要进行藻种培养过程日常管理工作了。藻种培养中的日常管理工作有要有7个。第一个就是给藻液搅拌充气,在开放式培养中,搅拌充气是十分必要的。搅拌充气可以防止藻细胞沉降,减少附壁或沉底。下面我们来看一下搅拌和充气方法有哪些1、小型封闭式培养用摇动2、中继培养用搅拌3、生产性培养定时充气
藻种培养的第二个日常管理工作是进行养料与水分的补给。我们根据培养藻种的数量以及繁殖速度来决定养料与水分的补给。个体数量少、繁殖速度不大时,少补给或不补给,反之则多补给。
藻种培养的第三个日常管理工作是注意酸碱度的变化。藻类大量繁殖和生长的时候,二氧化碳被吸收利用,导致pH值上升。每天定时检查培养液的pH,掌控变化规律,如果酸碱度变化超过藻细胞的适应范围,会影响其生长繁殖。
藻种培养的第四个日常管理工作是调节光照。多利用太阳光源,调节光照强度,不足可利用人工光源补充。
藻种培养的第五个日常管理工作是调节温度。北方冬天温度过低可以采用暖气片或者是锅炉加热进行温度调节,温度过高可以采用通风、空调降低温度,进行温度调节。
藻种培养的第六个日常管理工作是防虫和防雨。晚上,室外开放式的培养的容器需加盖纱窗布,防止蚊子进入产卵及其它昆虫入侵,早上把盖打开。
藻种培养的第七个日常管理工作是生长情况的观察与检查。通过藻液呈现的颜色、藻细胞的运动或悬浮情况、是否有沉淀和附壁现象。有无菌膜及敌害生物污染迹象等来观察和了解。
微藻培养完成后就需要进行微藻的采收工作。目前常用的微藻的收获方法一般采用水泵直接抽取藻液经加密的过滤袋过滤,收集浓缩藻液。
回顾本节课,同学们重点要掌握微藻培养的工艺流程包括哪些环节,微藻培养过程的日常管理。

