第五章 水产饵料培养

第一节 室内培养

一、藻类培养

1、藻类的生长模式：单细胞藻类在培养过程中，生长繁殖的速度，出现一定的起伏，这种生长模式可划分为五个时期：
A 延缓期 这是接种后不久的时期，这个时期藻类生长繁殖不明显，近乎呈静止状态，称为延缓期；
B 指数增长期 细胞迅速地增长，数量以指数成倍增加；
C 相对生长下降期 细胞数量继续增加，增长速度和相对增殖量相对下降；
D 平衡期 细胞数量达高峰后保持相对稳定
E 消落期 藻类细胞大量死亡，细胞数目迅速减少，初期按指数下降，以后非指数下降。

2、培养方式：

封闭式培养：也叫密闭式培养，密闭式培养的目的是不使外界杂藻、菌类及其他有机体混入培养物中。将培养液密封在与外界完全隔离的透明容器中，由此通气、搅拌、输送培养液及调节水温和取样等设备，也都要与外界隔离。培养容器多为管状、也有池状，用有机玻璃或透明的聚乙烯所料做成水平管道，直立或斜立在地上，暴露阳光或人工光照下。这种培养方式，成本高，好控制，产量亦稳定。

开放式培养：将藻类培养于敞开的容器（如水泥池、管道、木盆等）中。方法设备较简便，可进行小量或大面积的培养。该法培养物中易发生敌害生物污染，但成本低，使用较普遍，也是今后藻类培养所应采取的方式。

3、营养液的配制：

发展藻类培养的营养配方时的主要考虑的问题是：
a． 盐的总浓度：大多是取决于有机体的生态来源。
b． 主要离子组分的组成及浓度：它们是钾、镁、钠、钙、硫酸盐和磷酸盐。
c． 氮源：硝酸盐、氨和尿素常用作配方中的氮源，根据藻种的性能和pH的最适点而定。藻类的生长主要依赖氮的可利用性。大多数微型藻干物中含有7～9％的氮。因此在1升培养液中生产10g细胞就至少需要500～600mg/L硝酸钾。
d． 碳源：无机碳通常是用含1～5％二氧化碳的空气来供应的，碳的另一种供应办法是用碳酸氢盐。选用何种办法主要是根据藻类生长的pH最适点而定。
e． pH：通常用偏酸的pH值来避免钙镁和其它微量元素发生沉淀。
f． 微量元素：培养基中的微量元素通常是用早已证明有效浓度的混合溶液来提供的（浓度在μgl-1级范围）。然而，这些微量元素的组分对藻类生长是否必须却不能总能显示。为增加微量元素的稳定性，常用柠檬酸盐和EDTA作为螯合剂。
g． 维生素：许多藻类要求有硫胺素和维生素B12的供应。

4、藻种的接种：

A.藻种的选择：
所选择的生物种应具有下列特征：
⑴生长迅速；
⑵对极端的温度和辐射条件的耐性范围大；
⑶蛋白质，脂类和糖类含量高，或有选择地积累一种特殊的代谢产物（如甘油）；
⑷无毒性，且易于收获。
根据系统的要求和特殊的方法，还可有其他要求。

B.接种：
再分离到单纯藻群后，就可接种到培养液中进行培养，进而移养扩大培养。接种方法有液体接种和干藻接种。前者是将藻液直接加入培养液中进行搅拌，加入的藻种分量视水温而定，水温较低（10℃以内）时，多加；约占培养液总量的30～40％左右，水温适宜时（25～30℃左右），可加5～8％左右。后者是用干藻的藻体接种，接种量为0.1～0.2％。

5、防治：

二、浮游动物的培养

对培养浮游动物影响较大的因素有饲养用水的水质、水温、盐度、pH、含氧量、光照、饵料的种类和数量、容器的大小等，现分述如下：
㈠ 培养用水：培养用水可用海水、湖泊或池沼里的水，或者保存2～3周的住家井水或自来水。在用自来水时，每升水中要加入5～8毫克的硫代硫酸钠以除去水中的氯。饲养时，为防止由于细菌繁殖而造成的水质恶变，最好添加青霉素或链霉素等抗生素。但抗生素的效果只在36小时之内。因此，如果在10～12℃以下培养，并且注意水的交换，可不添加抗生素。
㈡ 水温和盐度：在一定范围内，温度越高其摄食速度、生长速度也越快。饲养水温应与该种动物栖息场所的水温相适应。为了提高生长速度或繁殖速度，应考虑栖息现场的水温变动幅度，并尽量接近上限。对饲养用水的盐度问题研究较少，怎样影响浮游动物尚无充分了解。
㈢ pH和含氧量：培养用水的pH值一般都保持7.0～8.5。含氧量都希望达到接近饱和的条件。如桡足类克氏纺锤镖水蚤Acartia clausi在高密度（380个／L）下饲养时，如果含氧量低于3.2 mg/L，就将全部死亡（Zillioux，1969）。
㈣ 光照：饲养浮游动物的光照条件各种各样，其效果无明显差异，但必须避免直射日光。
㈤ 饵料：现在常用于浮游动物的饵料有五大类：
①培养的硅藻类和植物性鞭毛虫类。②培养的轮虫类、枝角类和桡足类等。③卤虫无节幼体。④酵母、小麦粉、大豆粉、酱油粕、海藻粉末以及相应配方的配合饵料等人工饵料。⑤用网采集的天然浮游动物。
㈥ 饲养容器：一般以水槽、指管或土池培养浮游动物，主要采用静水方式培养。

淡水枝角类及蒙古裸腹溞的培养方法
1. 淡水枝角类: 枝角类的培养易于掌握，但大量培养时需注意如下几点：
⑴ 班塔法（Banta）：
　　培养液为肥泥1kg、马粪（发酵过）170克、过滤池水10升。将上述培养液放在15～18℃处，过3～4天，用细筛绢过滤；然后用过滤池水适当冲稀（1:2～4），便可使用。培养液要常更换，以确保饵料充分供给。这种培养液培养的枝角类常红色，并产卵较多，是一种良好的培养液。
⑵ 用绿藻培养枝角类法：单细胞绿藻，小球藻和栅藻等是枝角类的天然饵料，可直接用于培养枝角类，以免投饵的麻烦。这种单细胞培养液配制如下：
　　每立方米水中放硝酸铵3.5～35g； 过磷酸盐6.6～26.4g，为确保藻类的不断繁殖，需经常追加这两种无机盐类。
⑶ 土池培养法：1m深的土池，注入50cm的水，加入混合堆肥液汁，促使单细胞藻类和细菌大量繁殖，然后移入溞、裸腹溞等，在温度20～25℃时，3～4天后即可大量繁殖。一般在良好环境下，可产800 g/m3·d。
　　培养期间要注意观察水温、水质、浮游植物等，更应观察溞是否怀卵、卵形及卵数，有无冬卵，体色及消化道情况等。溞的颜色应为淡黄色，略带红色或淡绿色；肠道应为绿色或深褐色；卵应为圆形、暗色，数量在10～20个以上。如果溞体色很淡，肠呈蓝绿或黑色，卵数少，椭圆且浅绿，并出现大批雄溞或动乱的，同时种群中幼体数小于成体数；这都是培养情况恶化的象征，应抓紧采取措施或重新培养。 
2. 蒙古裸腹溞: 该溞种从内陆盐水中采得，现已成功驯化于海水中正常生长繁殖。其大量培养方法与淡水枝角类相似，培养用水为海水，盐度30-32左右，温度25℃为宜。用小球藻或微绿球藻加酵母投喂。小球藻要适当扩种培养，以便满足大量培养蒙古裸腹溞的需要。小球藻扩种可用水泥池，培养用水应消毒、施肥，并给以一定的光照。用这种方法培养蒙古裸腹溞，溞的最大培养密度可达7000～1000 /L, 生产量可达70g/m3od。

轮虫的培养方法
　　目前，用于水产动物育苗生产上室内工厂化培养的轮虫主要是褶皱臂尾轮虫，可以用培养的小球藻、扁藻、衣藻等为饵料。培养时水温保持20～25℃，pH值保持7～8，投以105～106个细胞／毫升的小球藻，也可投喂酵母培养。或将800mL 马粪和1000mL水混合煮沸约1h，待冷却后过滤，以二倍冷沸水冲稀，亦可用于培养轮虫。

原生动物的培养：
　　原生动物的培养方法较多，如用植物液溶解在水中供细菌繁殖生长过程中利用，这时溶液混浊，纤毛虫就可繁殖起来。具体方法为：
　　杂草50克、自来水1000mL，煮沸2h，放置1昼夜后过滤，以滤液为培养液，用显微镜从野外污水中吸选纤毛虫，接种于培养液，在20℃下培养一周，能繁生大量纤毛虫。
　　淡水鞭毛虫类Polytoma的培养液配方为：在1L蒸馏水中加胨2g、动物胶150g，醋酸钠2克、磷酸二氢钾0.25g、硫酸镁0.25g。

卤虫
　　常见的一种为盐卤虫 Artemia salina：分布甚广，沿海及内陆的咸水湖泊常见，我国西北地区特别丰富，有待开发利用。多为雌性个体，通常以孤雌生殖的方式来繁殖后代；只有在环境不良时才出现雄性个体，行有性繁殖，产生休眠卵，渡过恶劣的环境；有些种群只行孤雌生殖，终年不见雄性个体的出现。卤虫的适应力很强，生长迅速，卵易保存，并可在人工控制条件下培养作活饵料。

第二节 敞池培养

单细胞敞池培养：传统的单胞藻培养是筑建饵料室，遵循保种——接种——扩种——生产性培养的程序，其优点是能保证纯种生产，避免原生动物等有害生物的干扰，对贝类育苗是必须的，但对河蟹等甲壳动物幼体来说，采用敞池比较粗放地培养单胞藻更为经济实用。因为他们不像贝类幼体那样惧怕原生动物，也不需要纯而又纯的某种单胞藻。相反，由各种藻类和少量小型浮游动物组成的群落，在营养上更加优质全面，由于池塘底泥、水源和大气中到处蕴藏着大量的藻类孢子，所以不必引种，只要选择好培育池并采取若干人为措施，即可增殖成功。

轮虫的敞池培养：单胞藻、轮虫、枝角类和桡足类同为水产经济动物幼体的优质活饵料。其中轮虫的作用与地位格外重要。日本等国从20～30年代就开始进行轮虫工厂化培养技术的研究，近年来生产规模逐渐扩大，产量不断增加，室内水泥池密度可达1000个/ml以上，用小球藻为饵料培养轮虫密度甚至高达2000～4000个/ml；但这种技术仅限于室内工厂化养殖。其投资大、费用高，要想在我国广泛推广尚有难度。特别是用于土池生态育苗，需要量特别大，集约化程度低，必须考虑土池生产轮虫等活饵料的问题。
　　轮虫的休眠卵通常蕴藏在水体沉积物中。上世纪中叶，国外有人企图从水体沉积物中查找休眠卵作为培养轮虫的种源，如将混有轮虫休眠卵的沉积物置镜下直接计数，或用"萌发法"，从孵出的虫体数推算沉积物中的卵量，但此两法不能分离卵也不能准确定量。长期以来，广泛蕴藏于水体沉积物中的轮虫休眠卵资源无法查清和开发利用。迄今我国淡水鱼苗生产仍沿用传统的"豆浆法"，海水育苗则被迫采用价格昂贵且适口性差的卤虫幼体，成本高，成活率低，严重限制了苗种生产的发展。如能找到一种合适的定性、定量轮虫休眠卵的方法，查清其资源，将为敞池增殖轮虫打下坚实的基础。

枝角类的敞池培养：枝角类体长约0.5-3mm，营养丰富，活动缓慢，是鱼类、甲壳动物幼体继轮虫之后的适口活饵料。当环境条件适宜时，枝角类连续进行孤雌生殖。可在短时间内形成高密度种群，且持续时间长。因此，长期以来人们就采捕天然发生的枝角类（红虫）作为养殖鱼类或观赏鱼类的饵料。

　　枝角类除少数几种，如圆囊溞属（Podon）、尖头溞属（Penilia）和三角溞属（Evadne）中的几个种可在近海出现，一种耐盐性极强的蒙古裸腹溞（Moina monglica）在内陆咸水中繁殖外，其余绝大多数种类均生活于淡水中。但由于它们个体大小、介壳厚度和适应性的差异，其饵料意义和培养价值也有所区别。