掌握原核生物翻译起始的过程，了解真核生物翻译起始的特点，熟悉原核生物肽链延长的三个步骤及延长因子的作用。

一、氨基酸的活化

(1)氨基酰-tRNA合成酶。

氨基酰-tRNA合成酶可高度特异识别氨基酸及tRNA底物，保证各氨基酸与相应数种tRNA准确结合。氨基酸-tRNA合成酶催化的反应分为两步：

氨基酸＋ATP-E─→氨基酸-AMP-E＋PPi

氨基酰-AMP-E＋tRNA ─→氨基酰-tRNA+AMP + E

此反应使氨基酸羧基活化，并使活化氨基酸转移到tRNA 3'端CCA-OH，形成氨基酸的活性形式，氨基酰-tRNA。

(2)氨基酰-tRNA的表示方法

原核细胞tRNA携带的甲硫氨酸可被甲酰化，称tRNAifmet，fMet- tRNAifmet专一识别起始密码AUG，第一个进入核蛋白体循环。

二、翻译起始 (原核生物)

生成由起始氨基酰-tRNA、mRNA和核蛋白体组成的70S起始复合物，原核生物的起始因子(IF)有三种。其过程在原核生物和真核大同小异。

(1) 核蛋白体大、小亚基分离。

(2)  mRNA结合小亚基 mRNA起始密码上游为S-D序列，可与小亚基16S rRNA 3'端互补。紧接S-D序列的短核苷酸序列可被小亚基蛋白识别结合，两方面作用促使mRNA在小亚基上定位。

(3)  fmet-tRNAi结合于mRNA-小亚基复合体的AUG上，形成30S起始复合体。

(4) 大亚基加入30S起始复合体，形成70S起始复合体。

三、真核生物翻译起始的特点

真核生物核蛋白体为80S（60S + 40S），包含10种起始因子（eIF）。

1.真核起始甲硫氨酸不需甲酰化。

2.真核mRNA没有S-D序列，但5'端帽子结构与其在核蛋白体就位相关。帽结合蛋白（CBP）可与mRNA帽子结合，促进mRNA与小亚基结合。

四、肽链的延长

延长阶段为不断循环进行的过程，也称核蛋白体循环。分为进位、成肽和转位三个步骤。真核及原核生物的延长，主要是延长因子体系的不同。

(1)进位

根据A位上密码引导，相应的氨基酰-tRNA进入A位，称为进位。EF-T由EF-Tu和EF-Ts两个亚基组成，EF-Tu-GTP与氨基酰-tRNA形成氨基酰-tRNA-Tu-GTP三元复合物并进入A位，消耗GTP完成进位，释出EF-Tu-GDP，EF-Ts促进EF-Tu释出GDP，并重新形成EF-T，再次被利用。

（2）成肽

转肽酶催化催化P位上甲酰甲硫氨酰基或肽酰基转移给A位上进入的氨基酰-tRNA，形成肽键连接，生成的二肽酰-tRNA占据A位，P位连有空载 tRNA，将迅速从核蛋白体脱落。

（3）转位

EFG有转位酶活性，催化A位二肽酰tRNA进入P位，同时核蛋白体沿mRNA移动一个密码子，A位再次空缺，开第3个氨基酰-tRNA进位。重复上述循环，肽链在N端加入一个氨基酸。使P位依次出现3肽、4肽等。

五、肽链合成终止（原核）

终止需要释放因子RF、RR。真核生物仅需一种释放因子，有GTP酶活性。

1、任何氨基酰-tRNA不辨认终止密码，由 RF-1辨认终止密码UAA、UAG；RF-2辨认UAA、UGA。

2、RF-3可使转肽酶的构象改变，发挥酯酶活性水解多肽、脱离tRNA。

3、在RR作用下，tRNA、mRNA、RF与核蛋白体分离。大、小亚基分开，重新参与蛋白质合成过程。

多聚核蛋白体循环：在翻译时多个核蛋白体结合于同一条mRNA上，称为在mRNA上的密度与模板的长度有关。可使蛋白质高速、高效同时合成多条肽链。

蛋白质生物合成是很多天然抗生素的作用靶点，它们就是通过阻断真核、原核生物蛋白质翻译体系某组分功能，干扰和抑制蛋白质生物合成过程而起作用。

氨基糖苷类药物影响蛋白质合成的整个过程。氨基糖苷类药物进入人体后，会通过革兰氏阴性菌表面的亲水性通道进入细菌细胞内部，与核糖体30S小亚基以及信使RNA起始密码子结合，形成无法移动的复合物，这种复合物叫做链霉素单体。链霉素单体的形成使蛋白质的合成停止在起始阶段，从而影响细菌的生存。而且，还会解构正在进行蛋白质合成的核糖体，提前终止蛋白质的合成；或者干扰正在进行中的蛋白质合成，提供错误的氨基酸，使得合成出的蛋白无法行使应有的功能。

四环素类抗生素能与细菌核糖体30S小亚基上的16SrRNA结合，抑制氨酰-tRNA进入核糖体A-位置，而在自然界中，这种结合是可逆的。

红霉素可以透过细菌细胞膜，在接近P位与细菌核糖体的50S大亚基成可逆性结合，阻断转移氨酰-tRNA结合在P位上，同时也阻断多肽链自A位至P位的转移，从而抑制细菌蛋白质合成。