兽医传染病学

曲哲会、刘涛、董建国

目录

  • 1 绪论
    • 1.1 绪论
    • 1.2 家畜传染病防制研究的主要成就
    • 1.3 家畜传染病防制研究的发展方向
  • 2 兽医传染病的传染过程和流行过程
    • 2.1 感染和传染病的概念
    • 2.2 感染的类型和传染病的分类
    • 2.3 传染病病程的发展阶段
    • 2.4 家畜传染病流行过程的基本环节
    • 2.5 疫源地和自然疫源地
    • 2.6 流行过程发展的某些规律性
    • 2.7 影响流行过程的因素
  • 3 兽医传染病的防疫措施
    • 3.1 防疫工作的基本原则和内容
    • 3.2 疫情报告和诊断
    • 3.3 检疫
    • 3.4 ​隔离和封锁
    • 3.5 消毒、杀虫、灭鼠、防鸟
    • 3.6 免疫接种和药物预防
    • 3.7 传染病病畜的治疗
  • 4 人畜共患传染病
    • 4.1 第一节 大肠杆菌病
    • 4.2 第二节 沙门氏菌病
    • 4.3 第三节 链球菌病
    • 4.4 第四节 布鲁氏菌病
    • 4.5 第五节 结核病
    • 4.6 第六节 口蹄疫
    • 4.7 第七节 狂犬病
    • 4.8 第八节 流行性乙型脑炎
  • 5 第三章 猪的传染病
    • 5.1 第一节 猪瘟
    • 5.2 第二节非洲猪瘟
    • 5.3 第三节 伪狂犬
    • 5.4 第四节 猪圆环病毒病
    • 5.5 第五节 猪繁殖与呼吸综合征
    • 5.6 第六节 猪流行性腹泻
    • 5.7 第七节 猪传染性胃肠炎
    • 5.8 第八节 猪细小病毒病
    • 5.9 第九节 猪丹毒
    • 5.10 第十节 猪支原体肺炎
    • 5.11 第十一节  副猪嗜血杆菌病
    • 5.12 第十二节 猪接触传染性胸膜肺炎
    • 5.13 第十三节 猪传染性萎缩性鼻炎
    • 5.14 第十四节 猪增生性肠炎
  • 6 第六章 反刍动物传染病
    • 6.1 第一节 小反刍兽疫
    • 6.2 第二节羊支原体性肺炎
    • 6.3 第三节 羊梭菌性疾病
    • 6.4 第四节 牛病毒性腹泻-黏膜病
    • 6.5 第五节 牛传染性胸膜肺炎
第七节 猪传染性胃肠炎

本病是由传染性胃肠炎病毒引起的猪的一种急性胃肠道传染病,临诊上以发热、呕吐、严重腹泻、脱水和2周龄以内仔猪高死亡率为特征,属于国际兽疫局(OIE)法典B类疫病中必须检疫的猪传染病。该病可发生于各种年龄的猪,但对仔猪的影响最为严重。10日龄以内的仔猪死亡率高达100%5周龄以上的猪感染后的死亡率较低,成年猪感染后几乎没有死亡,但严重影响猪的增重和降低饲料报酬。1946DoyleHutchings首次报道该病发生于美国,然后逐渐传播到欧洲、日本和我国的台湾。我国大陆最早于1956年在广东省的揭阳、惠州和汕头等地的猪场发现本病。目前该病广泛存在于许多养猪国家和地区,造成严重的经济损失。

病原  传染性胃肠炎病毒(TGEV)属于冠状病毒科冠状病毒属。TGEV病毒粒子多呈圆形或椭圆形,直径为80~120nm,有囊膜,其表面有一层棒状纤突,长约12~25nmTGEV对光照和高温敏感,在阳光照射下6小时、56 45分钟或65 10分钟即可灭活。病毒对乙醚和氯仿敏感,对许多消毒剂也较敏感,可被去氧胆酸钠、福尔马林、氢氧化钠等灭活。病毒在胆汁中很稳定,对胰蛋白酶也有抵抗力,可耐受0.5%的胰蛋白酶1小时。病毒在pH4~9的环境中稳定;在低温条件下,pH3时也较稳定。某些毒株的TGEV可以凝集鸡红细胞。

TGEV基因组为不分节段的单股正链RNA,大小约28.5kb,与核蛋白相结合,具有感染性。基因组编码8个开放阅读框ORF), TGEV有四种结构蛋白(S、M、NsM)和三种非结构蛋白(ORF13和7的编码产物)。其中S基因编码纤突糖蛋白SE2蛋白,形成病毒的囊膜突起。S蛋白具有多种生物学活性:携带主要的B淋巴细胞表位,诱导产生中和抗体;含有宿主细胞氨肽酶受体(PAPN)的识别位点,决定宿主细胞的亲嗜性;决定病毒的致病性;具有细胞膜融合作用,使病毒核蛋白进入细胞浆;决定病毒的血凝活性。M基因编码膜蛋白ME1蛋白,主要包埋在脂质囊膜中。

TGEV基因组的整个复制和转录循环是在细胞浆中进行的。从病毒衣壳中释放出来的正链RNA基因组具有mRNA活性,翻译产生病毒特异性RNA聚合酶。在该RNA聚合酶的作用下先合成互补的负链和7个亚基因组RNA。因此,在感染细胞内可检测出4种病毒特异的RNA,即基因组RNA、双链型复制中间体、亚基因组RNA和分散存在的mRNA。病毒在细胞的空泡中,通过内质网以出芽的方式成熟,在细胞浆中常可见到病毒颗粒。

到目前为止,世界各地所分离的TGEV毒株均属同一个血清型。在抗原上与猪呼吸道冠状病毒(PRCV)、猫传染性腹膜炎病毒和犬冠状病毒有一定的相关性,特别是与PRCV的核苷酸和氨基酸序列有96%的同源性,并已证明PCRV是由TGEV突变而来。但与人的传染性非典型肺炎(Severe Acute Respiratory Syndrome SARS)冠状病毒之间无抗原关系。病毒可在猪的肾细胞、甲状腺细胞、唾液腺细胞和睾丸细胞以及狗和猫的肾细胞中培养,其中以甲状腺细胞最为敏感,接种后24小时即可出现典型的致细胞病理变化作用(CPE)。

流行病学  本病只侵害猪,其它动物经口服感染病毒均不发病。但德国有犬自然发病的个别报道。各种年龄的猪均有易感性,10日龄以内的仔猪最为敏感,发病率和死亡率都很高,有时高达100%。随着年龄的增长,临诊症状减轻,多数能自然康复,但可长期带毒。如果与PRCV混合感染,则会使病情恶化。该病主要以暴发性和地方流行性两种形式发生。新疫区呈流行性发生,传播迅速,1周内可传遍整个猪群。老疫区则呈现地方流行性或间歇性。猪场中曾感染过TGEV的母猪具有免疫力,一般不会重复感染。当TGEV侵入产仔房,无免疫力的哺乳仔猪和断奶猪可以发生感染。该病的发生具有明显的季节性,以冬春寒冷季节较为严重。

病猪和带毒猪是主要传染源。特别是密闭猪舍,湿度大,猪只集中的猪场,更易传播。它们通过粪便、乳汁、鼻液、呕吐物或呼出的气体排出病毒,污染饲料、饮水、空气及用具等,再由消化道和呼吸道侵入易感猪体内。带毒的犬、猫和鸟类也可能传播此病。

发病机理  TGEV经鼻腔或口腔到达胃,能抵抗低pH值和蛋白水解酶的作用而到达小肠,与高度敏感的小肠上皮细胞接触,或通过血流直达小肠上皮细胞,依靠病毒N蛋白的作用定居在细胞核内。大量细胞受到感染,细胞终止分化,其功能迅速改变或破坏。小肠内酶活性明显降低,扰乱了消化及细胞营养物质和电解质的运输,引起了消化吸收不良综合征。未被消化的乳糖存在于肠内,使渗透压明显增高,导致液体的滞留,甚至从机体组织中吸收液体,引起病猪失水、代谢性酸中毒,故发生腹泻和脱水。此外,空肠钠、电解质运输的改变及血管外蛋白质的丢失,引起电解质和水的积聚。死亡的最终原因可能是脱水、代谢性酸中毒和高血钾导致的心肾功能衰竭。

    临诊症状  潜伏期很短,一般为15~18h,有的长达2~3d。本病传播迅速,数日内可蔓延全群。仔猪突然发病,首先呕吐,继而发生频繁水样腹泻,粪便黄色、绿色或白色,常夹有未消化的凝乳块。其特征是含有大量电解质、水分和脂肪,呈碱性。病猪极度口渴,明显脱水,体重迅速减轻,日龄越小、病程越短、病死率越高。10日龄以内的仔猪多在2~7d内死亡,如母猪发病或泌乳量减少,小猪得不到足够的乳汁,营养严重失调,会导致病情加剧,小猪病死率增加。随着日龄的增长,病死率逐渐降低。病愈仔猪生长发育不良。

幼猪、肥猪和母猪的临诊症状轻重不一,通常只有1d至数天出现食欲不振或废绝。个别猪有呕吐,出现灰色、褐色水样腹泻,呈喷射状,5~8d腹泻停止而康复,极少死亡。某些哺乳母猪与仔猪密切接触,反复感染,临诊症状较重,体温升高、泌乳停止,呕吐和腹泻。但也有一些哺乳母猪与病仔猪接触,而本身并无临诊症状。

病理变化  尸体脱水明显,主要病理变化在胃和小肠。哺乳仔猪的胃常胀满,滞留有未消化的凝乳块。3日龄小猪中,约50%在胃横膈膜憩室部黏膜下有出血斑,胃底部黏膜充血或不同程度的出血,肠内充满白色或黄绿色液体,含有泡沫和未消化的小乳块,肠壁变薄而无弹性,肠管扩张呈半透明状。肠上皮细胞脱落最早发生于腹泻后2小时,另外,可见肠系膜充血,肠系膜淋巴结轻度或严重充血肿大。将空肠纵向剪开,用生理盐水将肠内容物冲掉,在玻璃平皿内铺平,加入少量生理盐水,在低倍显微镜下观察,可见到空肠绒毛显著缩短。组织学检查,黏膜上皮细胞变性脱落。肠上皮细胞变性后呈扁平或方形的未成熟细胞。

    诊断  根据流行病学、临诊症状和病理变化进行综合判定可以作出诊断。确诊须进行实验室诊断。

    病毒分离和鉴定  取病猪的肛拭、粪、肠内容物或空肠、回肠段为病料,经口感染5日龄仔猪或将病料处理后接种猪肾细胞培养,盲传2代以上,分离病毒,并接种于仔猪,根据产生TGE典型临诊症状、病理变化,在细胞培养上见产生细胞病理变化,并用标准阳性血清做中和试验进行鉴定。也可以应用免疫电镜检查病毒。

    荧光抗体检查病毒抗原  取腹泻早期病猪空肠和回肠的刮削物作涂片或以这段肠管冰冻切片,进行直接或间接荧光染色,然后用缓冲甘油封裱,在荧光显微镜下检查,见上皮细胞及沿着绒毛的胞浆性膜上呈现荧光者为阳性。此法快速,可在2~3h内报告结果。

    血清学诊断  取急性期和康复期双份血清样品,经56灭活30min,进行二倍法稀释,每个稀释度均与等量的本病毒悬液(滴度约为200TCID50/0.1m1)混合,置37 60min,然后取混合液0.1mL接种PKl5细胞单层,经培养24~48h观察结果,凡能中和50%以上试管内病毒生长的最高血清稀释度,即为该血清的中和抗体滴度。康复期血清滴度超过急性期4倍以上者即为阳性。

RT-PCR快速诊断法  根据TGEV标准毒株的基因序列,设计合成一对引物,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对发病猪的粪便进行检测,结果得到与预期大小相一致的扩增产物,则可证实该病毒为TGEV

由于本病病毒和猪流行性腹泻病毒PEDV、猪轮状病毒RV是引起猪病毒性腹泻最主要的三种病毒,临诊症状都是以腹泻为主,很难区分。要鉴别诊断,用电镜可以很容易区分冠状病毒和轮状病毒,但是不能区分PEDVTGEV,用分子生物学技术如 cDNA探针、RT-PCR等可快速鉴别诊断以上三种病毒,病毒间无交叉反应。另外还应注意将本病与仔猪黄痢、仔猪白痢区分开(见附表4)。

防制  本病尚无有效的治疗药物,在患病期间大量补充葡萄糖氯化钠溶液,供给大量清洁饮水和易消化的饲料,可使较大的病猪加速恢复。口服、磺胺、呋喃西林、黄连素、高锰酸钾等可防止继发感染,减轻临诊症状。应用口服补液盐氯化钠3.5克,碳酸氢钠2.5克,氯化钾1.5克,葡萄糖20克,加温水1000m1供猪自饮或灌服,疗效显著,康复迅速。

特别注意不从疫区引种,以免病原传入。应强化猪场的卫生管理,定期消毒,免疫预防是防制TGE的有效方法。TGE是典型的局部感染和黏膜免疫,只有通过黏膜免疫产生IgA才具有抗感染能力,IgG的作用很弱。口服、鼻内接种方法可能与刺激分泌性IgA免疫系统有关,使黏膜固有层淋巴细胞分泌肠内SIgA抗体,除抗体介导免疫外,细胞介导免疫应答在抗TGE感染时也起重要作用。另外,关于TGEV的免疫大多数是对妊娠母猪于临产前20~40天经口、鼻和乳腺接种,使母猪产生抗体。这种抗体在乳中效价较高,持续时间较长。仔猪可从乳中获得母源抗体而得到被动免疫保护,此谓乳源免疫。

国外有多种弱毒疫苗使用,接种的途径也不一样。我国哈尔滨兽医研究所成功研制了猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联灭活苗和弱毒苗,适用于疫情稳定的猪场(特别是种猪场)。这两个二联疫苗配套使用为最终防制和消灭此两种病毒性腹泻病提供了强有力的手段。怀孕母猪口服活毒苗常产生较高的抗体水平,它不仅对母猪本身产生保护力,而且其母源抗体对哺乳仔猪保护力也较高。已感染TGEV的怀孕母猪经非肠道接种TGEV弱毒苗后或用TGEV自家灭活苗后海穴接种后,其抗体水平可得到很大的提高。另外,亚单位疫苗、重组活载体疫苗及转基因植物疫苗尚处于研究阶段。

 

小结  本病是由传染性胃肠炎病毒引起的猪的一种急性胃肠道传染病,其临床特征为严重呕吐和水泻,从而导致迅速脱水,2周龄内仔猪发病率和死亡率均很高。应注意本病与其他消化道疾病的鉴别诊断