蛋白质的分离和纯化

一、盐析法和沉淀法

盐析(salt precipitation)是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质沉淀析出。

低温有机溶剂沉淀法：使用丙酮沉淀时，必须在0～4℃低温下进行，丙酮用量一般10倍于蛋白质溶液体积。蛋白质被丙酮沉淀后，应立即分离。也可用乙醇沉淀。

二、电泳法

蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒，在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术, 称为电泳(elctrophoresis) 。

三、透析法

透析(dialysis)：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法

四、层析法

层析(chromatography)分离蛋白质的原理：待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少及亲和力等，使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配，并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的 。

离子交换层析：利用各蛋白质的电荷量及性质不同进行分离。

凝胶过滤(gel filtration)又称分子筛层析：利用各蛋白质分子大小不同分离。

五、超速离心法

超速离心法（ultra-centrifugation）既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量 。